基因探針 | 台灣精品獎-歷屆得獎名單
![基因探針](https://i.imgur.com/DERULla.jpg)
基因探針(probe)又稱「寡核苷酸探針」,簡稱「探針」,就是一段與目的基因或DNA互補的特異核苷酸序列,它可以包括整個基因,也可以僅僅是/基因的一部分;可以是DNA ...
![基因探針](https://i.imgur.com/DERULla.jpg)
基因探針,即核酸[1]探針[2],是一段帶有檢測標記,且順序已知的,與目的基因[3]互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交[4]與目的基因結合,產生雜交信號,能從浩翰的基因組[5]中把目的基因顯示出來。根據雜交原理,作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件:①應是單鏈[6],若為雙鏈,必須先行變性處理。②應帶有容易被檢測的標記。它可以包括整個基因,也可以僅僅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之轉錄[7]而來的RNA。
簡要概述基因探針(probe)又稱「寡核苷酸探針[8]」,簡稱「探針」,就是一段與目的基因或DNA互補的特異核苷酸序列[9],它可以包括整個基因,也可以僅僅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之轉錄而來的RNA。
1.探針的來源 DNA探針根據其來源有3種:一種來自基因組中有關的基因本身,稱為基因組探針[10](genomic probe);另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA,再通過逆轉錄[11]得到的探針,稱為cDNa 探針(cDNa probe)。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內含子[12]序列。此外,還可在體外人工合成鹼基[13]數不多的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。
2.探針的製備 進行分子[14]突變[15]需要大量的探針拷貝,後者一般是通過分子克隆[16](molecular cloning)獲得的。克隆是指用無性繁殖方法獲得同一個體、細胞[17]或分子的大量複製品。當製備基因組DNA探針進,應先製備基因組文庫[18],即把基因組DNA打斷,或用限制性酶作不完全水解,得到許多大小不等的隨機片段,將這些片段體外重組[19]到運載體(噬菌體[20]、質體[21]等)中去,再將後者轉染[22]適當的宿主[23]細胞如大腸[24]肝菌,這時在固體培養基[25]上可以得到許多攜帶有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通過原位雜交[26],從中可篩出含有目...
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